唐双焱：生物传感器辅助下的途径关键酶改造

　　唐双焱，中国科学院微生物研究所研究员。报告题目：生物传感器辅助下的途径关键酶改造。内容摘要：在天然产物异源生物合成中，合成途径的过表达通常给宿主菌带来代谢负担，影响工程菌的生长进而造成产量下降。因此关键酶活性的提升是提高天然产物合成效率的重要手段。对香豆酸:辅酶A连接酶（4CL）是合成一系列重要芳香族天然产物的途径关键酶。为了采用定向进化手段对该酶的活性进行改造，首先需要构建高通量筛选工具。我们改造了诱导调控蛋白TtgR，使其能够特异性结合白藜芦醇分子并激活其调控的启动子PttgR表达下游荧光蛋白。因此，通过监控细胞的荧光强度可实时反映细胞内白藜芦醇的浓度。这样的TtgR突变体可以作为白藜芦醇的生物传感器使用。在白藜芦醇的生物合成途径中，4CL是关键酶，通过建立4CL的突变体文库，并用白藜芦醇生物传感器高通量筛选白藜芦醇高产菌，成功获得了活性提高的4CL突变体，该高活力4CL不仅有助于白藜芦醇的高效合成，亦可用于一系列芳香族化合物的生物合成。